仪器设备、耗品莹光光度计离心脱水机

发布时间: 2019-10-18

     膜结构工程中的蛋白和脂类具备相对性侧面流通性；细胞质是由磷脂双分子层和包镶、围绕之中及吸咐在其表层的蛋白质组成的，磷脂双分子层疏水的尾端以内，亲水性头顶部出外。

试验方式基本原理常见于科学研究膜脂流通性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH掺加到细胞质脂烃链区后，物质黏度提升，顺反异构遭受抑止，变成能发亮的全反结构式。

试验原材料肿瘤干细胞

实验试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液DPH

仪器设备、耗品莹光光度计离心脱水机

试验流程

1.  取多数生育期的肿瘤干细胞，以pH7.2，0.01 mol/l 磷酸盐缓冲液清洗2次。

2.  取107个体细胞，抽滤，添加2×106 mol/l DPH水溶液2 ml。

3.  25℃震荡温育30 min，再用PBS清洗1次。

4.  飘浮于4 ml PBS水溶液中。

5.  测量仪器设备为莹光光度计，在激起光波长362 nm，发射点光波长432 nm，间隙10标准下测量莹光抗压强度。

常见问题

    因为DPH可进到体细胞內部，之后又生成了其阳型正离子化合物1-（4-三甲胺苯基）-6-苯基-1,3,5-己三烯（TMDPH）。TMDPH不可以穿透细胞质进到体细胞，因而，基础理论上TMDPH标识法较DPH标识法更能**的体现膜脂流通性。

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