*新科研速递:在实验室生成的人造细胞也许可解释原始活细胞**次是怎样形成复制能力的。研究人员以前通过将蛋白质和DNA装到小小的类脂球中生成了模型细胞。他们能够对这些模型细胞进行操纵,以让其复制DNA并一分为二,但不能复制细胞周期——活细胞连续生长和分裂的过程。Tadashi Sugawara及同事通过建立一个简单的方法来将新分裂的人造细胞与其他模仿细胞的类脂球融合的办法对这一复制特性进行了模拟。这为新形成的人造细胞提供了重启这一过程所需的全部蛋白质、类脂和DNA,从而在一个实验室人工环境中创建了一个细胞周期模型。摘自<Nature出版集团旗下子刊《Nature Communications》杂志>
上等的ATCC菌种是专业的技术支撑的体现。我公司有专业的细胞培养员和ATCC菌种|** 复旦细胞库,目前库容有各类细胞,有各类肿瘤细胞、耐药细胞株、原代细胞株等。可以进行常规的细胞实验,MTT、PI染色、Annexin V、细胞迁移、细胞转染等检测。
ATCC菌种
ATCC菌种|细胞株
ATCC菌种 【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
ATCC菌种 【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
ATCC菌种 【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使ATCC菌种|细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
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ATCC菌种 【注意事项】
**生物实验室专业人士提醒广大科研实验者,购买ATCC菌种培养,注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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小徐20180425