培养基的类型

1、按培养基成分

 所用原料的化学成分明确、稳定     如葡萄糖、硫酸铵

 适于研究菌种基本代谢和过程的物质变化等科研工作；在生产某些疫苗的过程中，为了防止异性蛋白质等杂质掺入，也常用合成培养基；

 营养单一、价格较高，不适于大规模生产

2）天然培养基

 原料是一些天然动、植物产品     如花生饼粉、蛋白胨等

 来源广泛（大多为农副产品）、营养丰富、价格低廉、适于工业化生产

 一般不需要另加微量元素、维生素等物质

 由于成分复杂，不易重复，如对原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性

 

 

3.半合成（组合）培养基

         (semi-defined medium)：

          在合成培养基的基础上添加些天然成份，以更有效地满足微生物对营养物的需要.

   如马铃薯-蔗糖培养基

 

2、按物理状态分

1）固体

天然固体营养基质制成的培养基（如培养霉菌的培养），或在液体培养基中加入一定量凝固剂（琼脂1.5～2％)而呈固体状态的培养基。

为微生物的生长提供营养表面。

常用于微生物的分离、纯化、计数、生理测定、育种和菌种保藏，抗生素检测等方面的研究。

可依使用目的不同而制成斜面、平板等形式. 适于菌种和孢子的培养与保存，也广泛应用于有子实体的真菌类，如香菇、白木耳等的生产； 近年来由于机械化程度的提高，在发酵工业上又开始应用固体培养基进行大规模生产，其组分常用麸皮、大米、小米、木屑、禾壳等。

2）半固体

 琼脂0.5%-0.8% 

 主用于鉴定细菌、观察细菌运动特征及噬菌体的效价测定等

3）液体

发酵工业大规模使用的培养基

液体培养基不含任何凝固剂，菌体与培养基充分接触，操作方便。

常用于大规模的工业化生产以及在实验室进行微生物生理代谢等基本理论的研究工作。

可根据培养后的“浊度”判断微生物的生长情况.

 

 

3、根据培养基用途来分

基础培养基  富集培养基  选择培养基  鉴别培养基

孢子培养基  种子培养基  发酵培养基

1）孢子培养基

供菌种繁殖孢子的培养基，常用固体培养基。

孢子培养基基本要求：

   基本要**能使菌体迅速生长，产生较多上等孢子，且不易引起菌种发生变异。

配制时需注意：

A）营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。

如灰色链霉菌在葡萄糖-硝酸盐-其他盐的培养基上都能很好地生长和产生孢子，但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后，就只长菌体而不产孢子

B）所用无机盐的浓度要适量，否则会影响孢子量和孢子颜色。

C）注意pH和培养基的湿度。

常用孢子培养基：

◆  麸皮培养基          ◆ 小米培养基

◆ 大米培养基           ◆ 玉米碎屑培养基

◆  用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制的琼脂斜面培养基

大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少、疏松、表面积大，是良好的孢子培养基。

2）种子培养基(seed culture medium)——

供孢子发芽、生长和菌体繁殖的培养基。

细菌培养基——营养肉汤（nutrient broth)： 

    牛肉膏    3g；       水    1000ml；

    蛋白胨    5g ；      NaCl 5g ;          pH 7.2~7.4

放线菌培养基——高氏1号（淀粉硝酸盐培养基）：

     可溶性淀粉    20g；         KNO3    1g;      K2HPO4    1g

     MgSO4             0.5g           NaCl      1g;      FeSO4?7H2O  0.5g

             水 1000ml;     pH 7.2~7.4

霉菌培养基——查氏（zapek)培养基（蔗糖硝酸盐培养基）：

      蔗糖     30g;       NaNO3    3g;        MgSO4.H2O     0.5g; 

      KCl     0.5g;      K2HPO4    1g;      FeSO4     0.5g 

      水    1000ml;      pH 6.7

酵母菌——麦芽汁培养基

干麦芽粉加4倍水，在50℃-60℃糖化3-4小时，用碘液试验检查至糖化完全为止，调整糖液浓度为10。巴林，煮沸后，纱布过滤，调pH为6.0。

营养要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也要高些，但总浓度以略稀薄为好，这样可达较高的溶解氧，供大量菌体生长和繁殖。

种子培养基的成分要考虑在代谢过程中能维持稳定的pH，其成分还要根据不同菌种的主要特征而定。

 一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源，因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用，有利菌体的迅速生长，所以在种子培养基中常包括有机氮源和无机氮源。

 *后**的种子培养基的成分*好能较接近于发酵培养基，这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应，快速生长。

3）发酵培养基

供菌体生长、繁殖和合成大量代谢产物用的培养基。

既要使种子接入后能迅速生长，达到一定的菌体浓度，又要使长好的菌体能迅速合成所需产物。因此，发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有合成产物所需的特定元素、前体和促进剂等。

但若因生长和合成产物所需的总的碳源、氮源和其他营养物质总的浓度太高，或生长和合成产物两个阶段各需的*佳条件有求不同时，则可考虑培养基用分批补料工艺来加以满足。

3.5 根据培养基用途来分

①基础培养基(minimum medium):   

是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养成分的培养基； 

基础培养基也可作为一些特殊培养基的基础成分（如制备糖发酵培养基时）.

② 加富培养基(enriched medium)：

在基本培养基中加入某些特殊的营养物质，如血、血清、动植物组织液或其他营养物质（或生长因子）的一类营养丰富的培养基。

③ 富集培养基

用来富集（使数量上占优势）和分离某种特定微生物。

   或用以培养营养要求苛刻的微生物 .

④ 选择培养基(selective medium)：

是根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要（投其所好），或根据对某种化合物的敏感性情况（取其所抗）而设计出来的一类培养基。

具体说，是加入相应的特殊营养物质或有抑菌性的化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长,而促进所需微生物的生长。

    用于将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中

      分离出来.

（续上表）

例：伊红美兰（Eosin-Methylene Blue）乳糖培养基（简称EMB培养基）——用于食品卫生的微生物学检验，检验食品样品的“大肠菌群”的指标。

⑤鉴别培养基(differential medium)：

用于鉴别不同类型微生物的培养基。

在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品，从而产生某种明显的特征性变化，以区别不同的微生物以便于根据目的选择性挑取或计数等。

大肠菌群的定义：指存在与大肠内的，分解乳糖产酸产气的G-短杆菌,包括大肠杆菌和产气肠杆菌和一些中间类型的细菌。

  伊红和美蓝二种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G-细菌的生长。在低酸度时, 这二种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用.

试样中的多种肠道菌会在EMB培养基上产生相

互容易区分的特征菌落, 因而易于辨认。

例如：大肠杆菌强烈分解乳糖而产生大量的混合酸, 菌体呈酸性,菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。

 

选择性培养的结果

⑥增殖和保存培养基

一般营养比较丰富，适合微生物是生长的特点，使微生物生长快速、多产又性状典型。

菌株保存培养基成分不同于生长培养基。为了更好地保存微生物的活力和生理学特征，在培养基中应不加葡萄糖。

⑦测定培养基

用于测定微生物的数量及抗生素、维生素的含量等

由于培养基的用途不同，其组成差异很大。

在实际应用中，选择培养基和鉴别培养基两种功能结合在一种培养基中。

例如，ＥＭＢ培养基除有鉴别不同菌落的作用外，同时还有抑制革兰氏阳性菌、选择革兰氏阴性细菌的作用。

小结

培养基的类型         分类依据                      类型      营养物质来源              天然、合成、半合成      培养基物理状态          液体、固体、半液体     培养基的成分和目的   基本、完全、鉴别、选择      生产工艺的要求          孢子(Spore)、种子、发酵

培养基的用途：筛选菌种、保藏菌种、检验杂菌、培养种子、发酵生产等。