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化学试剂常用培养基用途及配法介绍

化学试剂常用培养基用途及配法介绍

一、化学试剂液体基础培养基
1.化学试剂蛋白胨水
[用途] 用于细菌靛基质试验;一般细菌培养和传代。
[配法] 蛋白胨(或胰蛋白胨)
10g,氯化钠 5g,蒸馏水1L。 将上述成分溶于水中,校正pH 至7.2,分装试管,每管2~3ml,置121℃灭菌15min备用。 [质量控制] 大肠埃希菌生长良好,靛基质阳性;伤寒沙门菌生长良好,靛基质阴性。 
2.化学试剂营养肉汤
[用途] 一般细菌的增菌培养,加入1%的琼脂粉亦可作营养琼脂。
[配法] 蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1L。 将上述成分称量混合溶解于水中,校正pH至7.4,按用途不同分装于烧瓶或试管内。经121℃灭菌15min,作无菌试验后冷藏备用。 [质量控制] 金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌生长良好。
[保存] 置冰箱3周内用完。
3.化学试剂牛肉浸液培养基
[用途] 细菌培养*基础的培养基,除用于一般细菌的培养外,又可以作营养琼脂及其它培养基的基础。
[配法] 新鲜除脂牛肉 500g,氯化钠5g 蛋白胨10g,蒸馏水1L。 先将牛肉清洗,除脂肪、肌腱,并切块绞碎。称取500g置容器加入蒸馏水1L,搅匀后置冰箱过夜,次日煮沸加热30min,并用玻棒不时搅拌用绒布或麻布进行粗过滤,再用脱脂棉过滤即成。在过滤中加入蛋白胨10g、氯化钠5g溶解后,用氢氧化钠溶液校正pH至7.6~7.8,并加热煮沸10min,补充蒸馏水至1L,*后用滤纸过滤,呈清晰透明、淡黄色液体,经121℃15min灭菌备用。
[用法] 根据用途不同可以制成营养肉汤,以此为基础制成其它培养基。如制作固体培养基,加入琼脂15 ~20g/L即可。 [质量控制] 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌等均生长良好。 [保存] 置4℃冰箱内可以使用较长时间。 注:商品牛肉浸膏粉,一般使用量为3~5g/L。
 
 二、化学试剂固体基础培养基 
1化学试剂营养琼脂
[用途] 一般细菌和菌株的纯化及传种。
[配法] 蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂粉(上等)12g,蒸馏水1L。 将上述成分(除琼脂外)溶于水
中,校正pH 7.2~7.4后加入琼脂,煮沸溶解,根据用途不同进行分装,经121℃灭菌15min,倾注平板或制
成斜面,冷藏备用。 [质量控制] 金黄色葡萄球菌菌落呈浅黄色; 痢疾志贺菌菌落无色;铜绿假单胞菌 菌落
无色或浅绿色。 [保存] 置4℃冰箱保存,2周内用完。 
 
2.化学试剂血琼脂培养基
[用途] 一般病原菌的分离培养和溶血性鉴别及保存菌种。
[配法] pH 7.4~7.6牛肉浸液琼脂 100ml,脱纤维羊血(或兔血) 5~10ml。 将血琼脂基础经121℃灭菌15min,待冷却至50℃左右以无菌手续加入羊血,摇匀后立即倾注灭菌平皿内,待凝固后,经无菌实验冷藏备用。
[质量控制] 化脓性链球菌ATCC 19615生长良好,β-溶血;肺炎链球菌ATCC 6303生长良好,α-溶血;表皮葡萄球菌ATCC 12228 生长良好,不溶血。 [保存] 置4℃冰箱,1周内用完。
3.化学试剂巧克力琼脂培养基 [用途] 主要用于嗜血杆菌的分离培养,亦可用于奈瑟菌的增殖培养。
实验室常用化学试剂基础培养基。
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