Envision两步法免疫组化试剂盒

品名：二步法抗兔/鼠通用型免疫组化检测试剂盒（ChemMateTMEnVision＋/HRP/DAB   Rb & Mo）   
编号：GK500705                               
储存：2-8℃                             
剂型： 工作液                               
适用： 一抗为兔抗或小鼠抗的免疫组化检测

该试剂盒是一个特别敏感的二步法免疫组化试剂盒，适合与兔抗抗体或小鼠抗抗体配用。其中ChemMateTMEnVision是标记有辣根过氧化物酶和抗兔及抗小鼠免疫球蛋白的多聚体分子，相当于二抗，它与兔抗或小鼠抗一抗结合。结合后的大分子即标记有辣根过氧化物酶，再与DAB反应，得到棕色显色。由于该系统不含生物素和链亲和素，所以不受内源型生物素干扰。染色背景非常清晰。
该系统敏感性强；实验步骤少，省时；操作简单，背景低。

盒内含试剂：
A瓶：ChemMateTMEnVision＋/HRP，兔/小鼠   5ml
B瓶： DAB缓冲稀释液             12.5ml
C瓶： DAB原液                0.25ml

DAB工作液的配制：实验前，按每毫升B液（DAB稀释液）中加1滴（或20微升）C液（DAB原液）的浓度配制所需要的用量，混匀后备用。

实验步骤：
常规脱蜡水化：将已在烤箱中干燥过的石蜡切片浸于二甲苯中10分钟，三次。取出切片置于100％无水乙醇中10分钟两次；依次置入90％－70％各级酒精各10分钟。取出置于蒸馏水中。
ChemMateTMEnVision＋/HRP/DAB，兔/鼠二步法染色：
1）取出蒸馏水中的切片，甩掉并擦干切片上组织周围的液体，平放于湿盒中，滴加过氧化物酶阻断剂（常用3％过氧化氢）于组织上避光孵育5－20分钟。蒸馏水冲洗，再将切片置入TBS或PBS缓冲液中，浸泡5分钟，三次。取出切片，甩掉并擦干组织周围的液体（组织切勿干燥），平放于湿盒中。
2）滴加50－100微升一抗（抗兔或小鼠）工作液于组织上，室温孵育30分钟。用TBS或PBS冲洗切片。将切片置入TBS或PBS缓冲液中，浸泡5分钟，3次，取出切片，甩掉并擦干组织周围的液体（组织切勿干燥），平放于湿盒中。
3）滴加50－100微升A液（ChemMateTMEnVision＋/HRP）于组织上，室温孵育30分钟。用TBS或PBS冲洗切片。将切片置入TBS或PBS缓冲液中，浸泡5分钟，3次，取出切片，甩掉并擦干组织周围的液体（组织切勿干燥），平放于湿盒中。
4）滴加预备好的显色剂DAB工作液50－100微升。室温孵育5－30分钟。或光镜下控制显色。显色完全后，用蒸馏水冲洗终止显色。
5） 需要时，苏木精复染。
6） 各级酒精（700－100％）脱水，每级10分钟。取出切片置入二甲苯10分钟，三次。
7） 用封片胶封片。