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脑钠素(BNP)ELISA试剂盒组成及试剂配制与操作注意事项分析


发布时间: 2018-07-19
脑钠素(BNP)ELISA试剂盒组成及试剂配制:
    1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
    2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
    3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
    4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
    5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
    6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
    7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
    8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
    9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
    10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
脑钠素(BNP)ELISA试剂盒操作注意事项:
    (1)脑钠素(BNP)ELISA试剂盒应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
    (2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
    (3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
    (4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
    (5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
    (6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    a:标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
    b:冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
    c:浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
    d:反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
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