脑钠素(BNP)ELISA试剂盒组成及试剂配制与操作注意事项分析

脑钠素(BNP)ELISA试剂盒组成及试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
脑钠素(BNP)ELISA试剂盒操作注意事项：
(1）脑钠素(BNP)ELISA试剂盒应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
(2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
(3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
(4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
(5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
(6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
注
a：标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
b：冻结标本溶解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混合，不要在混匀器上强烈震荡。
c：浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤，澄清后再检测。
d：反复冻融会使蛋白效价降低，所以代测样本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。

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