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末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒检测原理与样本要求分析

    末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒检测原理:采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)含量。
末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒注意事项
    1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
    2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
    3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
    4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。
    5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。
    6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。
    7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
    8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。
    9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒样本要求
    1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
    2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
    3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。

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