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卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒原理与产品优点介绍
卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)elisa试剂盒采用双
抗体
夹心ELISA法。用抗OVA sIgE抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的OVA sIgE与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗OVA sIgE抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗OVA sIgE抗体与结合在包被抗体上的人OVA sIgE结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,OVA sIgE浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中OVA sIgE的浓度。
卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)elisa试剂盒
优点如下:
(1)、高效、灵敏、特异的抗体;
(2)、稳定的重复性和可靠性;
(3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
(4)、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
(5)、节省实验经费。
卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)elisa试剂盒
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA试剂盒样本的处理方式及检测方法的介绍
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