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连蛋白(zonulin)ELISA试剂盒的实验如何获得更理想的结果
连蛋白(zonulin)ELI
SA试剂盒
操作要获得更理想的ELISA实验结果,需知:
1)请**配制标准品及工作液A和B,以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;
2)酶标板在温育时应加膜覆盖以避免液体蒸发;
3)检测液A和检测液B,以及底物溶液在使用前,应置于37℃温育30分钟待用;
4)洗板后应尽快进行下一步操作,避免酶标板长时间处于干燥状态。
连蛋白(zonulin)ELISA试剂盒技术原理:
(1)抗原或
抗体
的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2)结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3)酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4)受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5)此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6)加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
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