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可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒检测中样品如何处理及结果判定

可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒检测中样品的处理
    1.细胞培养物上清:细胞培养物于室温1000g,离心10分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。
    2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
    3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
    4.尿液:无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要长期保存尿样,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。

    5.组织匀浆:将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。注:取样和样品处理过程中,防止有毒物质对操作人员的危害,要采取相应的保护措施。

可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒结果判断与分析
    1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的待测物质标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒使用注意事项:
    1.可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒检测前,检查各种仪器,打开酶标仪,稳定20分钟左右。
    2.检测样本要澄清,不能含杂物,否则会直接影响结果。
    3.实验开始前要将试剂盒取出,室温放置30-40分钟,使各种试剂都恢复到室温,以使检测结果更为稳定。
    4.尽量做双标准实验,这样可以保证数据的准确性。
    5.底物具有毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,要避免接触。
    6.可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒实验中,要使底物避光保存,酶标板均可拆卸,多余的部分应密封好,低温保存。

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